免疫组化为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)的简称,是一项利用抗原抗体特异性结合的原理,通过使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原,对蛋白定位,定性的实验技术。
免疫组化主要用的是组织标本和细胞标本两大类,组织标本包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片。石蜡切片,对组织形态保存好,保存时间也长,虽然对组织抗原暴露有影响,但可以抗原修复,所以石蜡切片仍然是首选的标本制作方法。
实验对象
组织样本;已包埋的石蜡组织;切片;细胞。
以检测细胞为例。
(1)将细胞接种与细胞爬片上,使其汇合度为40%-50%,第二天后,即可进行免疫荧光实验;
(2)将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次;
(3)用4%的多聚甲醛固定,之后用PBS浸洗3次;
(4)0.5% Triton X-100室温通透20min;
(5)用PBS浸洗3次;
(6)加入稀释好的一抗,4°C孵育过夜;
(7)PBST浸洗3次,加入荧光二抗,室温孵育1h,PBST浸洗3次;
(8)DAPI染色:加入DAPI避光孵育5min,对样本进行染核,PBST浸洗4次;
(9)加入荧光猝灭剂封片页封片,荧光显微镜下采集图像。
项目名称 | 内容 | 周期 | 价格 |
免疫组化 | 免疫组化 | 2-3周 | 询价 |