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克隆形成
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技术简介


    细胞克隆形成实验是用来检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性等项目的重要技术方法。当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。其中细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。

   贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性增殖能力两个重要性状



 实验方法


将处于对数生长期的细胞胰酶消化后,完全培养基(基础培养基+10%胎牛血清)重悬成细胞悬液,并计数;

 

②细胞接种:于6孔板培养板中各实验组接种400-1,000个细胞/孔;

 

③继续培养到14天或绝大多数单个克隆中细胞数大于50为止,中途每隔3天进行换液并观察细胞状态;

 

④克隆完成后,在显微镜下对细胞进行拍照,然后PBS洗涤1次,每孔加入1 mL 4%多聚甲醛固定30-60 min,PBS洗涤;

 

⑤每孔加入结晶紫染液1ml,细胞10-20 min;

 

⑥PBS 洗涤细胞数次,晾干,数码相机拍照 (分别对整个六孔板及每个孔进行单独拍照)

 



服务内容


服务类型

客户提供

服务内容

周期

价格

克隆形成

²  细胞处理用药物或质粒

²  目的细胞(或选用我司细胞)

²  实验信息

Ø  细胞培养,接种

Ø  加药处理,培养14天以上

Ø  结晶紫染色,拍照

Ø  出具实验报告

2-3

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服务流程

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结果展示


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