产品简介
RNA pull-down是以目的RNA序列为中心,寻找或验证与该RNA片段结合的蛋白质。对目的RNA片段产物进行生物素标记,通过链霉亲合素固定到磁珠上,当目的RNA与蛋白质发生结合后,再将其余游离的蛋白质洗脱,即得到核酸与蛋白质结合产物。用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。
操作流程 |
试剂盒组分
名称 | 12 Tests | 24 Tests | 40 Tests | 储存条件 |
Streptavidin Magnetic Beads | 500 μL | 1 mL | 1.7 mL | 4℃,1年 |
Lysis Buffer | 7 mL | 14 mL | 22 mL | 4℃,1年 |
NT2 Buffer | 16 mL | 32 mL | 52 mL | 4℃,1年 |
RNA Structure Buffer | 650 μL | 1.3 mL | 2.2 mL | 4℃,1年 |
Wash Buffer | 32 mL | 64 mL | 110 mL | 4℃,1年 |
Elution Buffer | 650 μL | 1.3 mL | 1.8 mL | -20℃,1年 |
Protease inhibitor | 230 μL | 460 μL | 760 μL | -20℃,1年 |
RNase inhibitor | 65 μL | 130 μL | 180 μL | -20℃,1年 |
需自备试剂:RNA 探针、PBS缓冲液、RNase-free水
所需仪器:超声仪、低温离心机、混匀仪、磁力架