基因在疾病中的调控机制和功能研究
成功案例
2023-04-25
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根据近年来的研究,发现参与哺乳动物基因活动的lncRNA已经有上千个,研究者已发现lncRNA能够在多种层面调控基因表达,通常在表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等层面上参与基因表达调控。这里,我们以一lncRNA为例,研究其在疾病中的转录调控机制和功能研究。

 


研究思路:

首先,需要确定目的基因lncRNA在疾病种存在表达异常;

其次,研究目的基因lncRNA在疾病中的作用;

第三,通过组学实验,找出其下游的作用分子B,并进行验证;

第四,证明B分子与疾病的发展有关,寻找作用机制;

最后,进一步确定lncRNA的功能,通过敲除或过表达实验,进一步验证其在该疾病中的功能,随后得出结论。

 


研究路线:

1. 通过qpcr实验,验证lncRNA在正常组织和疾病组织中的表达异常,于此同时,由于后续有相关的细胞实验,故也选择3-5种疾病相关细胞和正常细胞进行验证,根据表达量高低来分析临床意义。

2. 通过体外实验,检测lncRNA在疾病中的作用。如敲低或过表达后,通过组学实验如蛋白组学、转录组学等,富集分析其与什么功能相关;再次,通过细胞实验,检测其相关功能,进一步验证目的基因在疾病中的作用。

3. 可通过RNA Pull down-MS实验,筛选与转录相关的转录因子和转录因子作用的蛋白;

4. 敲除lncRNA,检测下游作用蛋白表达是否发生变化,并进行相关功能研究;


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