DNA是体外研究DNA与蛋白结合的有力工具。通过对目的区域的DNA片段设计脱硫生物素标记的探针,脱硫生物素标记的探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素结合。经过裂解的蛋白混合物与DNA探针充分孵育后,与DNA作用的蛋白分子会与探针特异性结合,形成DNA-蛋白质复合物,通过洗脱,将结合的蛋白洗脱下来。最后再通过Western blot鉴定已知的蛋白,或者质谱鉴定未知的蛋白质。
(1) 细胞样本裂解:从细胞样本中提取核蛋白或总蛋白; (2) 生物素标记的DNA探针合成:DNA片段体外合成生物素标记的探针; (3) 生物素标记的DNA探针与磁珠孵育:这些DNA片段体外合成生物素标记后,可以与链霉亲和素磁珠结合; (4) 生物探针与蛋白孵育:将生物素标记的DNA片段与提取的核蛋白一起孵育,使之结合; (5) 洗涤和洗脱:孵育完成后,需要进行洗涤步骤以去除未结合的蛋白。随后,通过洗脱步骤将结合的蛋白从磁珠上分离出来。 (6) 蛋白检测:通过Western blot检测特异性蛋白是否与靶DNA片段结合,或者通过质谱法鉴定可能与DNA片段相互作用的蛋白质。 | ![]() |
● 服务内容
服务类型 | 客户提供 | 服务内容 | 周期 | 价格 |
DNA Pull down-WB |
ü DNA基因模板(或委托我司克隆/合成) ü 实验样本 ü 待验证目的蛋白WB抗体 ü 实验信息表
| ² 制备目的DNA探针 ² 样本裂解 ² Input Western blot检测目的蛋白 ² DNA Pull down实验 ² Western blot检测DNA Pull down产物 ² 出具实验报告 | 5周 | |
DNA Pull down-MS |
ü DNA基因模板(或委托我司克隆/合成) ü 实验样本 ü 实验信息表
| ² 制备目的DNA探针 ² 样本裂解 ² DNA Pull down实验 ² DNA Pull down产物质谱检测和分析 ² 出具实验报告 | 8周 |
● 结果展示
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