◆技术简介
基因克隆是指从生物体的组织或细胞中提取扩增目的基因或者人工合成目的基因，再将目的基因与载体连接，构成重组DNA分子。主要用于将目的基因插入到载体DNA分子中，构建成重组DNA分子。
载体构建是指采用限制性内切酶切割DNA分子，将目的DNA片段插入到另一个载体中或是将目的基因插入到已有的载体分子中，通常通过PCR扩增和限制性内切酶切割等技术后将目的基因与载体连接，构成重组DNA分子。
定点突变是在目的基因中引入碱基突变、缺失或者插入等，无论是针对载体 ，蛋白功能域还是基因调控元件。该技术是指通过PCR等方法向目的DNA片段中引入所需突变，包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，
基因克隆、载体构建和定点突变是基因工程中常用的技术手段，主要是目的基因的制取和实现自主复制，是基因研究工作中一种非常有用的手段。
我们的最终交付形式是包含目的基因片段的大肠杆菌和质粒，所有载体均经过100％测序验证。
◆实验方法
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① 选择载体:根据实验目的选择合适的载体，标签;如需构建稳定细胞株可以选择慢病毒载体，为方便筛选，可以选择带有抗性标签; ② 引物设计：针对目的基因和选出的载体，选择酶切位点，并针对目的基因进行引物设计; ③ 获取目的基因：获取目的基因的方法有多种，可以通过PCR在CDNA中扩展目的基因，可以选择全基因合成。 ④ 质检：凝胶验证目的基因大小是否符合预期，同时也可以纯化基因。 ⑤ 酶切：目的基因和载体用相同的限制性内切酶进行酶切，露出相同的粘性末端。 ⑥ 质检：凝胶检测目的基因和载体大小，同时纯化基因。 ⑦ 连接：目的基因于线性载体连接。 ⑧ 转化：转化感受态细菌，在细菌中进行自我复制和扩增; ⑨ 菌检：挑取菌落PCR验证和测序验证。
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◆服务内容
项目内容 | 客户提供 | 服务内容 |
基因克隆 | ² 实验样本 ² 目的载体（或选用我司载体） ² 实验信息 | Ø 总DNA提取 Ø 目的基因扩增 Ø 质粒准备、酶切连接、转换和筛选 Ø 测序和酶切验证 Ø 出具实验报告 |
亚克隆 | ² 目的基因质粒模板 ² 目的载体（或选用我司载体） ² 实验信息 | Ø 目的基因酶切 Ø 质粒准备、酶切连接、转换和筛选 Ø 测序和酶切验证 Ø 出具实验报告 |
载体构建 | ² 目的基因质粒模板（或我司全基因合成） ² 目的载体（或选用我司载体） ² 实验信息 | Ø 目的基因扩增 Ø 质粒准备、酶切连接、转换和筛选 Ø 测序和酶切验证 Ø 出具实验报告 |
定点突变 | ² 目的基因质粒模板 ² 目的载体 ² 实验信息 | Ø 目的基因扩增 Ø 质粒准备、酶切连接、转换和筛选 Ø 测序和酶切验证 Ø 出具实验报告 |
◆服务优势
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可根据客户的需求构建相应的载体，保证克隆序列正确、完整无突变 | 拥有多达5万多个不同种属基因的基因库以及多个载体的载体库，可以为客户提供各种现成的基因模板质粒以及目的载体； | |
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可购买所需的基因模板质粒及目的载体，再委托我们进行基因克隆，体验一站式服务。 | 专业的技术支持为您解决载体的选择、载体设计、实验难点等问题。 |
◆结果展示
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