◆技术简介
染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation assay, CHIP）是目前研究体内蛋白质与 DNA相互作用的方法。 它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质－DNA 复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的DNA小片段，然后通过免疫学方法沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的 DNA 片段，通过对目的片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。CHIP 不仅可以检测体内转录因子因子与 DNA 的动态作用，还可以用来研究组蛋白修饰与基因组的关系。
在活细胞状态下，使用甲醛将蛋白质-DNA复合物进行固定使保持蛋白和 DNA 联合，并通过超声或酶切将染色质打断为一定范围内的小片段，随后用抗体特异性识别抗原，特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段， IP过程中，目前多用精制的 prorein A 预先结合固化在 argarose 的 beads 上，使之与含有抗原的溶液 及抗体反应后，beads 上的 prorein A 就能吸附抗原达到精制的目的。
◆实验方法
① 甲醛处理固定细胞收集细胞; ② 对细胞进行裂解，并超声破碎DNA ③ 加入目的蛋白的抗体，与靶蛋白-DNA复合物相互结合; ④ 加入ProteinA，结合抗体-靶蛋白-DNA复合物; ⑤ 对沉淀下来的复合物进行清洗，除去一些非特异性结合; ⑥ 洗脱，得到富集的靶蛋白-DNA复合物; ⑦ 解交联，纯化富集的DNA片断; ⑧ 对分离得到的DNA片段进行PCR分析或者测序分析。 |
◆服务内容
服务类型 | 客户提供 | 服务内容 | 周期 | 价格 |
标签抗体 ChIP-qPCR |
ü 实验样本 ü 待验证目的蛋白WB抗体 ü 实验信息表
| ² 样本裂解 ² Input样本Western blot检测 ² 染色质免疫共沉淀ChIP实验 ² ChIP蛋白产物qPCR检测 ² 出具实验报告 | 3周 | |
内源抗体 ChIP-qPCR |
ü 实验样本 ü 诱饵蛋白ChIP抗体 ü 待验证目的蛋白WB抗体 ü 实验信息表
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标签抗体 ChIP-Seq |
ü 实验样本 ü 实验信息表
| ² 样本裂解 ² Input样本Western blot检测 ² 染色质免疫共沉淀ChIP实验 ² ChIP产物Seq测序和分析 ² 出具实验报告 | 7周 | |
内源抗体 ChIP- Seq |
ü 实验样本 ü 诱饵蛋白ChIP抗体 ü 实验信息表
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◆结果展示
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